Такие фаги можно детектировать по их резко снижен­ной способности расти на штаммах Е. coli, мутантных по генам polA или lig. Для этого все негативные колонии фага, образовавшиеся на бактериальном газоне после трансфекции кле­ток Е. coli фаговой ДНК, переносят последова­тельно по трафарету на чашки со свежезасеянными газонами Е. coli штаммов lig+. Те фаговые клоны, которые дают активный рост (образуют зону лизиса в месте укола) лишь на первом штамме, должны быть гибридными вариантами фага Я (имеют фенотип Red ). Однако гибрид­ная природа каждого фагового клона может быть доказана только дополнительными анали­зами молекул ДНК (гибридизация, рестрикционный анализ). Как видим, этот тест недоста­точно однозначен и кроме того трудоемок. Он не позволяет осуществлять прямой отбор гиб­ридных фаговых клонов. Значительно удобнее в работе EcoRl - векгоры внедрения на основе фага Я, у которых встройка фрагмента ДНК поврежда­ет ген репрессора . В этом случае векторы были получены на основе фага Aimm434 (рекомбинантный фаг Я, содержащий область иммунности лямбдоидного фага 434). Встройка фрагментов ДНК в ген cl фага Aimm434 выявляется по характерной морфологии бляшек (прозрачные у гибрида и с мутным цент­ром у исходного фага). Кроме того, удобный век­тор внедрения с системой прямого фенотипического отбора гибридов получен на основе трансдуцирующего фага Ар/яс5 . При встройке экзогенной ДНК в геном векторного фага Ар/ас5-1 по единственному fcoRI-месту нарушается ген 3-галактозидазы (lacZ), что лег­ко детектируется в прямом тесте титрования фагов на газоне Е. coli lacZ на чашках с инди­каторным красителем. З-Галактозидаза катали­зирует расщепление лактозы на глюкозу и га­лактозу, что приводит к закислению окружаю­щей среды. Изменение рН можно легко выявить на питательной среде с лактозой и с индикатор­ным красителем бромкрезоловым пурпурным (среда Мак-Конки). На такой среде темно-красного цвета векторный фагЯр/ас5-1 сбраживает лактозу, и бляшки, образуемые им при титрова­нии на газоне Е. coli lacTr, имеют желтое окра­шивание и окружены желтым ореолом. Гибрид­ные фаги на основе Яр/ас5-1 активную 3-галак - тозидазу не синтезируют и в описанных усло­виях формируют бляшки без изменения окрас­ки агаризованной питательной среды. При другом способе фенотипического выяв­ления гибридов на основе фагаЯр/ас5-1 в пита­тельную среду, на которой титруют препарат фага, добавляют 5-бром-4-хлор-3-индолил-3 - D-галактозид (обозначаемый Xgal). Данное сое­динение само по себе бесцветно. Однако при его гидролизе 3-галактозидазой образуется яр­ко-синий 5-бром-4-хлориндиго. Поэтому бляш­ки векторного фага Ар/ас5-1 на газоне Е. coli lacZ~ в присутствии Xgal будут окрашиваться в синий цвет, а гибридные варианты будут фор­мировать бесцветные бляшки. Широкое распространение в последние го­ды получил вектор внедрения Agt 11, очень схо­жий с Яр/ас5-1. Фаг Яgtll (lac5c\nin5Sam) имеет термочувствительный репрессор (CI857) и амбер-мутацию по гену S, делающую его не способным к лизису хозяйской клетки, не имеющей супрессора supF. Фаг Agtl 1 обычно используют в качестве экспрессирующего век­тора при встройке в него по. ЕсоШ-участку ДНК-копий матричных РНК.