Известно, что катионы цинка ингибируют действие протеаз Е. coli. Поэтому, вводя в пи­тательную среду определенное количество Zn2+, можно добиться значительного увеличе­ния уровня чужеродного белка, синтезируемого в клетках Е. coli. Генотип клетки - реципиента гибридной ДНК также может существенно влиять на эф­фективность извлечения из нее синтезирован­ного чужеродного белка в неповрежденном ви­де. В частности, использование штамма Е. coli, дефектного по гену отрТ, детерминирующему мембранную эндопротеазу, значительно облег­чает процедуру выделения нативного чужерод­ного белка из бактериальных клеток. Л. Симон с сотрудниками обнаружили, что при инфекции Е. coli фагами Т4, Т5 и Т7 происходит подавление деградации в клетках фрагментов белков и аномальных бел­ков. Нормальные белки клетки при этом рас­щепляются с прежней скоростью. Дальнейшие исследования позволили локализовать ген 49.1 фага Т4, ответственный за этот эффект, и проклонировать его в составе векторных плазмид Е. coli. Показано, что продукт гена pin ингибирует протеазу La клеток Е. coli. Поэтому введение в Е. coli гибридных плазмид, несущих фаговый ген pin, приводит к стабилизации, а следовательно, и к повышению выхода чуже­родных белков. К. Тэлмэйдж и В. Гилберт в 1982 г. предло­жили новый подход к стабилизации чужерод­ных белков в клетках Е. coli путем создания гибридного гена, белковый продукт которого способен секретироваться в периплазму Е. coli (см. 2.2.10), где он защищен от действия много­численных протеаз цитоплазмы клетки. На при­мере ряда эукариотических белков показано, что таким образом удается существенно повы­сить выход целевого белка. Стабилизации чужеродного белка или олигопептида в клетках Е. coli также можно до­биться, если создать ген, детерминирующий синтез высокомолекулярного белка, состоящего из нескольких тандемно повторенных копий це­левого белка или пептида. Например, путем дуп­ликации с сохранением рамки трансляции ко­дирующей последовательности синтетического гена соматомедина С человека, помещенного под контроль промотора фага А.