Сплайсинг осуществляется в сплайсингосомах. Рассмотрим поэтому их структуру, сборку и механизм действия. Сплайсин - госомы, выделенные из реакционной смеси в условиях, когда стадия расщепления заблокирована, представляют собой частицы в форме эллипса размером примерно 25 х 50 мкм (рис. 8.85). В этих частицах интрон связан с U1-, U2-, U4U6 - и 115-мяРНП одновременно. Функционально актив ные сплайсиигосомы содержат и другие белки, в частности те, которые участвуют во взаимодействии мяРНП с сайтами-мишенями или обычно связаны с ядерной про-мРНК. Для присоединения мяРНП к интрону, по-видимому, необходима лишь очень небольшая часть экзона. С 5′-сайтом сплайсинга сначала связывается U1-мяРНП независимо от присутствия функциональных сайтов связывания U2 - и и5-мяРНП; но этого недостаточно для последующего расщепления в 5′-сайте сплайсинга. Затем присоединяются U2-, U5 - и и4иб-мяРНП, для чего требуется АТР. Вероятно, присоединение Ш-мяРНП к соответствующему сайту в интроне осуществляется путем образования нуклеотидных пар; однако включение в сплайсингосому комплекса, содержащего U4U6 - и Ш-мяРНП, зависит от взаимодействий между мяРНП. По сходной схеме происходит сборка сплайсингосомы при сплайсинге про-мРНК дрожжей. Судьба сплайсингосомы после лигирования экзонов неясна, но отдельные мяРНП или их комплексы, вероятно, повторно используются для сплайсинга других нитронов, в то время как РНК интрона разрушается. Описанная последовательность реакций представляет лишь один из возможных вариантов сборки сплайсингосомы. Для того чтобы однозначно установить эту последовательность, необходимо исследовать взаимоотношения между предшественником и продуктом. В данной модели не объясняется также, каким образом расщепляется З’-сайт сплайсинга, как происходит лигирование и от чего зависит правильное соединение экзона.